艾滋病抗体检测方法 艾滋病抗体如何检测
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HIV抗体检测一般有两种方法,一种是酶联抗体法,其核心是使抗体与酶复合物结合,然后显色。第二快速法,即“金标法”,其测定结果只需专用检测试纸即可在短时间内就可获得。
1、酶联法:即“酶联免疫法”,简称ELISA。其核心在于使抗体与酶复合物结合,然后通过显色法检测。其过程非常简单:ELISA检测使用血清,首先血液要凝固至少半小时,然后取出血清。该酶复合物经稀释液稀释后,加血清和阴性、阳性对照,并进行质控。孵育一小时,然后洗板,加底物,半小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后读数。根据数字判断结果的阴性或阳性。
从严格意义上说,如果第一次检测结果是阳性,那么就必须根据CDCHIV操作程序进行第二次检测,如果是阳性,则必须送艾滋病确认化验室确认。
2、快速法:即“金标”或“胶体金法”,是国际上较为先进、灵敏、特异、快速、简便、准确的体外诊断方法。只需专用试纸就可以在很短的时间内就能得到检测结果。将艾滋病试纸(金标法)取血后滴入试纸,15分钟内观察试纸有无变色现象。
艾滋病快速检测法可以在家自行检测,操作简便,无需特殊仪器,在艾滋病试纸上先滴两滴血,再滴一滴稀释液,然后等待15分钟读出结果。结果试纸上有一条红色的直线,说明为阴性,如果有两条红线,那就是阳性。如检验呈阳性,按照HIV检测流程,需要复测。
利用艾滋病试纸快速检测(艾滋病试纸)应在专业人员的指导下进行,以确保整个自检操作过程规范正确,结果准确可靠。
3、一种蛋白质印迹方法(WB)
实验室常用的艾滋病诊断方法,主要用于确认试验,初筛呈阳性时,需用此方法进行确认实验。其基本原理是,HIV白带在SDS-PAGE电泳后,将已分离出的鸡蛋白带通过SDS-PAGE电泳,将已分离的不同的鸡蛋白带转移到硝酸纤维素薄膜上。这个薄膜被切成条,每个硝酸纤维素薄膜上都有经电泳分离的HIV病毒抗原。用稀薄液体稀释后的1/100样品,直接加入硝酸纤维素薄膜,恒温振荡,使之充分反应。如果血清中含有抗HIV抗体,则可与膜条上的抗原带结合。通过添加抗人IgG酶结合物及底物,可以使反应性抗原抗体结合带呈现紫褐色,根据条带的出现情况判断结果。
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